深入了解下分光光度計的使用原理

2022年04月21日 09:01:08人氣：153來源：上海奧析科學儀器有限公司

　　分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器。該儀器是實驗室、科研機構、醫(yī)療、農業(yè)、食品廠、飲用水廠等機構檢驗設備。已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。分光光度計基本原理是指采用一個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生特定波長的光源，光源透過測試的樣品后，部分光源被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比，其關系如下式：

　　A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc

　　式中：

　　A 為吸光度；

　　I。為入射的單色光強度；

　　I 為透射的單色光強度；

　　T 為物質的透射率；

　　k 為摩爾吸收系數(shù)；

　　L 為被分析物質的光程，即比色皿的邊長；

　　c 為物質的濃度。

　　物質對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數(shù)是該物質的物理常數(shù)。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區(qū)，除某些物質對光有吸收外，很多物質本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應用標準品或對照品同時操作。

關鍵詞：分光光度計光度計

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