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廣州領(lǐng)拓貿(mào)易有限公司
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更新時(shí)間：2022-11-30 12:59:01瀏覽次數(shù)：268次
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Nexera-e所提供的全二維液相色譜法通過將兩種獨(dú)立的分離模式相結(jié)合，進(jìn)一步拓展了液相色譜法的可能性。在藥物雜質(zhì)、蛋白質(zhì)酶解物、食品提取物等天然物質(zhì)或合成聚合物等復(fù)雜樣品的分析，利用Nexera-e所得到的新的分析結(jié)果，加深了對分析對象的理解，獲得全新的見解。
全二維液相色譜將兩種獨(dú)立的分離系統(tǒng)加以結(jié)合，可大幅度地提高分離性能，是全新的分析方法。通過多個(gè)分離系統(tǒng)的組合，可以分離使用一維LC難以分離的成分，為此，可應(yīng)用于復(fù)雜樣品的分析。另外，與一般的二維LC不同，獲取的數(shù)據(jù)反映出第1維與第2維雙方的分離結(jié)果，可限度地應(yīng)用雙方的分離系統(tǒng)。
全二維液相色譜將一維系統(tǒng)的洗脫液在二維譜圖上進(jìn)一步細(xì)致地分割解析，在線連續(xù)地在二維系統(tǒng)實(shí)施分離。通過2個(gè)環(huán)路的閥構(gòu)成一維與二維系統(tǒng)相交的流路結(jié)構(gòu)，切換閥使這些環(huán)路交替地重復(fù)進(jìn)行一維洗脫液分割和向二維系統(tǒng)注入的動(dòng)作。
全二維液相色譜系統(tǒng)的流路與動(dòng)作
全二維液相色譜分析的優(yōu)點(diǎn)不僅僅是高分離。在二維譜圖上，維軸與第二維軸可分別為不同的分離條件，因此，各成分的物性與圖上的位置相關(guān)。在二維譜圖上進(jìn)行解析，可對具有類似結(jié)構(gòu)的化合物分組，可直接觀察到各成分群，或在圖上解析未知成分的性質(zhì)。
磷脂39成分的同時(shí)分析
PG：磷脂 PE：磷脂酰乙醇胺 PA：磷脂酸
PI：磷脂酰肌醇 PS：磷脂?！C：磷脂酰
磷脂各成分通過第1維正相系統(tǒng)基于極性基團(tuán)種類進(jìn)行分離，通過第2維反相系統(tǒng)基于脂肪酸鏈長進(jìn)行分離。
上圖按種類分組表示各成分。
磷脂有以正離子模式較強(qiáng)檢出的成分和以負(fù)離子模式較強(qiáng)檢出的成分，但利用LCMS-8050的高速正負(fù)離子切換［UFswitching］檢測，可以在1次分析中獲得兩組數(shù)據(jù)。
為實(shí)現(xiàn)全二維液相色譜，要求各構(gòu)成組件具有性能。比如，二維分析系統(tǒng)滿足超快速梯度分析，即高流量且超高壓的送液要求。并且，為了解析樣品間的差異，還要求在上述分析條件下具有非常高的保留時(shí)間重現(xiàn)性。 Nexera-e采用具有水平的Nexera X2的各組件，具備充分滿足上述嚴(yán)苛要求的性能。比如，送液單元LC-30AD可至3 mL/min的高流量區(qū)域，并以130 MPa耐壓實(shí)施送液。與同樣可耐壓130 MPa的高壓流路切換閥FCV-32AH組合，擴(kuò)大了二維分析系統(tǒng)的選擇范圍。
Nexera-e 系統(tǒng)（PDA型號）
Nexera-e采用本公司自行開發(fā)的低容量流路切換閥。
全二維液相色譜需要頻繁的切換流路，因此，如果閥的密封因磨損易產(chǎn)生粉末，則可能在分析中造成流路堵塞等，有可能對分析產(chǎn)生重大影響。流路切換閥FCV-32AH采用了在開發(fā)Nexera X2的自動(dòng)進(jìn)樣器過程中培育優(yōu)異技術(shù)，排除了這種擔(dān)心。
對于基本上以超快速分析為主的全二維液相色譜來說，檢測器的高速采樣也非常重要。
Nexera X2的光電二極管陣列檢測器SPD-M30A達(dá)200 Hz，三重四極桿型質(zhì)譜儀LCMS-8050也通過采用UFMS技術(shù)而實(shí)現(xiàn)了超高速掃描，可從容地采集數(shù)據(jù)。
| 編號 | 成分 | 二維保留時(shí)間重現(xiàn)性 ［%RSD］ |
| 1 | Acetanilide | 0.43 |
| 2 | Methyl paraben | 0.37 |
| 3 | Acetophenone | 0.66 |
| 4 | Propyl paraben | 0.43 |
| 5 | Butyrophenone | 0.42 |
| 6 | Benzophenone | 0.35 |
| 7 | Hexanophenone | 0.43 |
標(biāo)準(zhǔn)品分析中各成分的保留時(shí)間重現(xiàn)性（n=6）
（1: Acetanilide, 2: Methyl paraben, 3: Acetophenone, 4: Propyl paraben, 5: Butyrophenone, 6: Benzophenone, 7: Hexanophenone)
數(shù)據(jù)采集所獲得的數(shù)據(jù)通過全二維液相色譜解析軟件ChromSquare變換為二維等高線數(shù)據(jù)。色譜圖上的峰在等高線數(shù)據(jù)上被識別為點(diǎn)，以這個(gè)點(diǎn)為單位進(jìn)行定性·定量解析處理。
磷脂標(biāo)準(zhǔn)樣品的LC×LC/MS數(shù)據(jù)解析
（左上：等高線圖（放大），左下：MS譜圖，右上：第2維的色譜圖，右下：等高線圖（整體））
隨著指針的移動(dòng)，顯示表示MS譜圖。比如，可以對有特征的點(diǎn)簡便地使用MS譜圖進(jìn)行定性分析。
與通常的HPLC分析相同，可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)樣品的分析結(jié)果制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行未知樣品的定量分析。
點(diǎn)整體的MS譜圖（紅線）和數(shù)據(jù)點(diǎn)的MS譜圖（藍(lán)線）
標(biāo)準(zhǔn)曲線
※ChromSquare為意大利Chromaleont S.r.l的產(chǎn)品。
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