樣品RNA的抽提：
①產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA質(zhì)量檢測
1）紫外吸收法測定
先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋（1:100）后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
① 濃度測定
A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為：A260 ×稀釋倍數(shù)× 40 g/ml。

實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μ
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測
三、注意事項
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。好設(shè)立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。

熒光定量PCR試劑盒技術(shù)：
本實用新型技術(shù)公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒，包括盒體，盒體由上盒體和下盒體組成，上盒體的底面上設(shè)有限位凸起，下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽，且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋，側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾，下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起，兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上；凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿，固定桿上通過轉(zhuǎn)動件轉(zhuǎn)動連接有用于放置試管的試管架；下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實用新型技術(shù)通過將盒體分為上下組合的兩個部分，并將兩個部分通過側(cè)蓋連接，即可保證試劑盒的便攜性，同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。
帕唑帕尼鹽酸鹽C16H10N2O25-溴-1-戊

噻托溴銨C10H8O42-甲基-5-羥基嘧啶

富馬酸福莫特羅 (二水）C20H20O72,5-二甲氧基磺酰氯

富馬酸福莫特羅(無水)C17H27,5-二氯-2,二

法羅培南(鈉)(2.5水)C25H22O10雙氫氯噻

法羅培南鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)C23H26N2O4四氫化鄰二甲酸酐

芐基肼C20H26O46-氟煙酸甲酯

芐基肼(標(biāo)準(zhǔn)品)C46H56N4O82-氯-甲氧基甲酸

氟/PMSFC13H16O5羧基-氟酸

奧利司他C16H20O6氯-磺?；姿?/span>

利福霉素鈉；利福霉素SV鈉C25H41,2-二乙酸

醋酸奧曲肽C9H10O22,二溴酸乙酯

S(+)-2-氨基-1-丁C20H30O21,二甲基金剛烷

D-鞘氨C17H17NO42-溴-5-甲氧基溴芐

糖脂;植物鞘C18H19NO5胡椒

甲磺丁脲C22H26O8溴-2-氯磺

甲磺丁脲(標(biāo)準(zhǔn)品)C37H42Cl2N2O5果糖二酮

奧美拉唑 C44H70O16N-十八烷基甲酰
節(jié)桿菌通用探針法熒光PCR檢測試劑盒肥大/干細(xì)胞生長因子受體(試劑盒/Sl/CD117)ELISA試劑盒CD44v10  CD44V10抗體100 ul

芳香酶ELISA試劑盒CD45/B220  白細(xì)胞共同抗原抗體300 ul

二酰基甘油(DAG/DG)ELISA試劑盒CD45  CD45單克隆抗體100 ul

二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒CD46/MCP  膜輔蛋白抗體100 ul

二氧化酶(DAO)ELISA試劑盒CD46/MCP  膜輔蛋白抗體100 ul

兒茶酚抑素ELISA試劑盒CD45RO  CD45RO抗100 ul

多萜長二酸寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶(DDOST/OST-48)ELISA試劑盒CD48/SLAMF2  CD48抗體100 ul

多肽YY(PYY)ELISA試劑盒CD58/LFA-3  淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原-3抗體100 ul

多巴D1受體(D1R)ELISA試劑盒Ingrin alpha 2/CD49b  整合素α2抗體1 Kit