小鼠主動脈內(nèi)皮細胞提取物操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

蘇云金芽胞桿菌殺蟲亞種 Bacillus thuringiensis subsp. entomocidus

蘇云金芽胞桿菌幕蟲亞種 Bacillus thuringiensis subsp. finitimus

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

印第安那亞種 Bacillus thuringiensis subsp. indiana

印第安那亞種 Bacillus thuringiensis subsp. indiana

蘇云金芽胞桿菌以色列亞種 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis

蘇云金芽胞桿菌以色列亞種 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis

蘇云金芽胞桿菌日本亞種 Bacillus thuringiensis subsp. japanensis

大腸桿菌 Escherichia coli

球孢鏈霉菌 Streptomyces globisporus