單分子定位超分辨顯微成像技術利用特殊熒光分子的光開關特性,突破衍射極限,將熒光顯微鏡的分辨率提高了一個數(shù)量級,可以揭示納米尺度下的亞細胞結構。因受定位原理的限制,該技術軸向分辨率比側向分辨率低2-3倍(一般為50nm左右),影響了其三維解析能力和應用。
在“蛋白質機器與生命過程調控”重點專項的支持下,中國科學院生物物理研究所研究人員通過研發(fā)非對稱干涉光路成像方法,突破了軸向分辨率的極限。與傳統(tǒng)的柱面鏡成像方法相比,非對稱干涉光路成像方法將定位精度提高了6倍以上,將單分子定位成像的軸向分辨率提升到了納米尺度,實現(xiàn)了軸向的單分子干涉定位成像。研究人員據此技術研制出了新型干涉定位顯微鏡(ROSE-Z),利用ROSE-Z顯微鏡的高分辨率三維解析能力,研究團隊成功實現(xiàn)了對細胞內微管直徑中空結構的解析。同時團隊在ROSE-Z顯微鏡的基礎上擴展了多色成像以及厚樣品成像功能,對細胞樣品進行了納米精度三維雙色成像,并驗證了細胞厚樣品成像能力。這些結果證明該方法在具備優(yōu)異的軸向分辨率的同時,也具備很高的可擴展性以及操作便捷性,為細胞內三維納米結構的研究提供了有力的研究工具。研究成果近期發(fā)表在Nature Methods雜志上。
(原標題:我國科學家研制出新型干涉定位顯微鏡ROSE-Z)
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